實(shí)驗目的：此次實(shí)驗樣品為人全血DNA；需要對生物DNA生物樣本需要打斷到150-300bp進(jìn)行后續的測序建庫實(shí)驗，為得到這一片段長(cháng)度下的樣本，需進(jìn)行梯度預實(shí)驗。

　　實(shí)驗設備：高通量聲波基因組剪切儀 JXDNA-500PICO

　　樣品前處理實(shí)驗操作過(guò)程：

　　1.在實(shí)驗開(kāi)始前，需要先提前準確好實(shí)驗超聲波剪切設備以及實(shí)驗所需應用的耗材和若干的實(shí)驗樣品

　　2.將適配器放入水槽中，再打開(kāi)冷水機對其進(jìn)行預冷直至4度

　　3.對生物樣本進(jìn)行稀釋?zhuān)瑢⑵?span style="font-size: 16px; text-wrap: wrap;">稀釋到同一濃度

　　4.把稀釋好的同一濃度的DNA樣本按照體積梯度將其投入樣品離心管內，標好編號，震蕩離心

　　5.把帶有樣品的離心管放入儀器的適配器內，但要注意水平配平，盡量將樣品放置在適配器外圈

　　6.啟動(dòng)儀器，調節程序運行參數，設置好能量，工作時(shí)間，間隙時(shí)間，循環(huán)工作，總時(shí)長(cháng)梯度為17min，20min，25min

　　7.待儀器程序運轉結束后，即可取出樣本，進(jìn)行電泳檢測

　　實(shí)驗操作注意事項：

　　1.同等條件下人體DNA樣本的打斷難度大于小鼠大于植物，而不同的實(shí)驗樣品需單獨進(jìn)行預實(shí)驗，不可混用實(shí)驗結果

　　2.注意樣品離心管內的樣本體積，需確保儀器內水位要蓋住樣品

　　3.離心管需要配平，適配器壓蓋禁止傾斜，避免樣本開(kāi)蓋污染

　　4.冷水機需要提前打開(kāi)預冷，水流循環(huán)要調整穩定不能過(guò)于激烈

　　樣品前處理實(shí)驗結果：

　　綜上結果可見(jiàn)，樣品投入量能影響檢測熒光強度，超聲打斷時(shí)間能影響片段長(cháng)度。綜合下機樣品的片段長(cháng)度和熒光強度，以及片段集中性，選擇20μL打斷25min作為實(shí)驗條件。

　　在高通量測序樣本制備過(guò)程中，DNA片段化處理是一個(gè)核心步驟。因此隨機、準確、集中無(wú)偏差的DNA片段化是保證DNA文庫質(zhì)量和均一性的關(guān)鍵一步。高通量聲波基因組剪切儀采用等溫、非接觸的方式對樣品進(jìn)行打斷、勻漿和混合，為DNA片段化又提供了新的研究手段，進(jìn)一步推動(dòng)了分子生物學(xué)的研究發(fā)展。